Adición de proteínas del plasma seminal ovino durante la congelación del espermatozoide y efectos sobre su motilidad y viabilidad

Fisiología animal

Palabras clave

2D PAGE; Espermatozoide Ovino; Criopreservación; Proteínas De La Membrana Espermática
  • Jaime Antonio Cardozo CORPOICA
  • Patricia Grasa Universidad de Zaragoza, España.
  • María Teresa Muiño B. Universidad de Zaragoza, España.
  • José Álvaro Cebrián P. Universidad de Zaragoza, España.


Este estudio se adelantó para evaluar el efecto de la adición de proteínas del plasma seminal de cordero en la criopreservación sobre la motilidad e integridad de la membrana espermática, y los cambios en el perfil electroforético de las proteínas de la membrana espermática inducidos por la criopreservación. Se usaron eyaculados de ocho corderos adultos de la raza rasa aragonesa, se les determinó su viabilidad y motilidad espermáticas y posteriormente se sometieron a un procedimiento de congelación. Las proteínas se separaron por el método de electroforesis en geles de acrilamida en dos dimensiones. Se obtuvo un mejoramiento significativo (p < 0,05) en la calidad del semen congelado, cuando se adicionaron proteínas del plasma seminal. El análisis bidimensional comparativo entre el semen fresco y el congelado evidenció la pérdida de 8 puntos de proteína en el espermatozoide descongelado. La concentración de un punto de proteína de membrana espermática, de bajo peso molecular (punto 2), fue más alta (p < 0,05) en el espermatozoide descongelado al que se adicionaron proteínas del plasma seminal. Se encontraron correlaciones entre algunos puntos de proteína y la motilidad y viabilidad espermáticas, lo cual sugiere que pueden jugar papeles importantes en el mantenimiento de la integridad y funcionalidad del espermatozoide. Se puede concluir que la adición de proteínas del plasma seminal en la congelación mejora la integridad del espermatozoide descongelado, y que la criopreservación del semen de cordero produce variaciones en la composición de las proteínas de membrana.  




No hay datos de descargas disponibles

Biografía del autor

Jaime Antonio Cardozo, CORPOICA

Investigador Ph.D. Asistente, Laboratorio de Microbiología Molecular, Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB).

Patricia Grasa, Universidad de Zaragoza, España.

Investigador Ph.D. Departamento de Bioquímica y Biología Molecular y Celular, Facultad de Veterinaria.

María Teresa Muiño B., Universidad de Zaragoza, España.

Profesor Investigador Ph.D. Departamento de Bioquímica y Biología Molecular y Celular, Facultad de Veterinaria.

José Álvaro Cebrián P., Universidad de Zaragoza, España.

Profesor Investigador Ph.D. Departamento de Bioquímica y Biología Molecular y Celular, Facultad de Veterinaria.

¿Cómo citar?
CARDOZO, Jaime Antonio et al. Adición de proteínas del plasma seminal ovino durante la congelación del espermatozoide y efectos sobre su motilidad y viabilidad. Corpoica Ciencia y Tecnología Agropecuaria, [S.l.], v. 10, n. 1, p. 51-59, june 2009. ISSN 2500-5308. Disponible en: <>. Fecha de acceso: 17 oct. 2017 doi:


Bailey JL, Bilodeau JF, Cormier N. 2000. Semen cryopreservation in domestic animals: a damaging and capacitating phenomenon. Journal of Andrology 21(1): 1-7.

Barrios B, Pérez-Pé R. Gallego M, Tato A, Osada J, Muiño-Blanco T, Cebrián-Pérez JA. 2000. Seminal plasma proteins revert the coldshock damage on ram sperm membrane. Biology of Reproduction 63: 1531-1537.

Bohring C, Krause E, Habermann B, Krause W. 2001. Isolation and identification of sperm membrane antigens recognized by antisperm antibodies, and their possible role in immunological infertility disease. Molecular Human Reproduction 7(2): 113-118.

Bradford MM. 1976. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analytical Biochemistry 72(1-2): 248-254.

Brandon CI, Heusner GL, Caudle AB, Fayrer-Hosken RA. 1999. Twodimensional polyacrylamide gel electrophoresis of equine seminal plasma proteins and their correlation with fertility. Theriogenology 52(5): 863-873.

Cardozo JA, Fernandez-Juan M, Forcada F, Abecia A, Muiño-Blanco T, Cebrián-Pérez JA. 2006. Monthly variations in ovine seminal plasma proteins analyzed by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis. Theriogenology 66(4): 841- 850

Desnoyers L, Therien I, Manjunath P. 1994. Characterization of the major proteins of bovine seminal fluid by two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis. Molecular Reproduction and Development 37(4): 425-435.

Evans G, Maxwell WMC. 1987. Semen and its characteristics. Salomon’s artificial insemination of sheep and goats. Sydney: Butterworth Scientific. pp 22-30.

Fiser PS, Ainsworth, Fairfull RV. 1987. Evaluation of a new diluent and different processing procedures for cryopreservation of ram semen. Theriogenology 28(5): 599-607.

Fiser PS, Fairfull RW. 1989. The effect of glycerol-related osmotic changes on post-thaw motility and acrosomal integrity of ram spermatozoa. Cryobiology 26(1): 64-69.

García-López N, Ollero M, Cebrián-Pérez JA, Muiño-Blanco T. 1996. Reversion of thermic-shock effect on ram spermatozoa by adsorption of seminal plasma proteins revealed by partition in aqueous two-phase systems. Journal of Chromatography B 680(1-2): 137-143.

Gorg A, Weiss W, Dunn MJ. 2004. Current two-dimensional electrophoresis technology for proteomics. Proteomics 4(12): 3665-3685.

Guillaume M, Sabido O, Durand P, Levy R. 2004. Cryopreservation Induces an Apoptosis-Like Mechanism in Bull Sperm. Biology of Reproduction 71(1): 28-37.

Haden NP, Hickox JR, Whisnant CS, Hardy DM. 2000. Systematic characterization of sperm-specific membrane proteins in swine. Biology of Reproduction 63(6): 1839-1847.

Hammerstedt RH, Graham JK, Nolan JP. 1990. Cryopreservation of mammalian sperm: What we ask them to survive. Journal of Andrology 11(1): 73-88.

Harrison RAP, Vickers SE. 1990. Use of fluorescent probes to assess membrane integrity in mammalian spermatozoa. Journal of Reproduction & Fertility 88: 343-352.

Harvey S, Zhang Y, Landry F, Miller C, Smith JW. 2001. Insights into a plasma membrane signature. Physiological Genomics 5(3): 129-136.

Holt WV, Head MF, North RD. 1992. Freeze-Induced Membrane Damage in Ram Spermatozoa Is Manifested After Thawing – Observations with Experimental Cryomicroscopy. Biology of Reproduction 46(6): 1086-1094.

Holt WV, North RD. 1994. Effects of temperature and restoration of osmotic equilibrium during thawing on the induction of plasma membrane damage in cryopreserved ram spermatozoa. Biology of Reproduction 51(3): 414-424.

Januskauskas A, Johannisson A, Rodriguez-Martinez H. 2003. Subtle membrane changes in cryopreserved bull semen in relation with sperm viability, chromatin structure, and field fertility. Theriogenology 60(4): 743-758.

Jobim MI, Oberst ER, Salbego CG, Souza DO, Wald VB, Tramontina F, Mattos RC. 2004. Two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis of bovine seminal plasma proteins and their relation with semen freezability. Theriogenology 61(3): 255-266.

Jobim MI, Oberst ER, Salbego CG, Wald VB, Horn AP, Mattos RC. 2005. BSP A1/A2-like proteins in ram seminal plasma. Theriogenology 63(7): 2053-2062.

Lessard C, Parent S, Leclerc P, Bailey JL, Sullivan R. 2000. Cryopreservation alters the levels of the bull sperm surface protein P25b. Journal of Andrology 21(5): 700-707.

Medeiros CM, Forell F, Oliveira AT, Rodrigues JL. 2002. Current status of sperm cryopreservation: why isn’t it better? Theriogenology 57(1): 327-344.

Mortarino M, Tedeschi G, Negri A, Ceciliani F, Gottardi L, Maffeo G, Ronchi S.1998. Two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis map of bull seminal plasma proteins. Electrophoresis 19(5): 797-801.

Naaby-Hansen S, Flickinger CJ, Herr JC. 1997. Two-dimensional gel electrophoretic analysis of vectorially labeled surface proteins of human spermatozoa. Biology of Reproduction 56(3): 771-787.

O’Farrell PH. 1975. High resolution two-dimensional electrophoresis of proteins. The Journal of Biological Chemistry 250(10): 4007-4021.

Olden K, Bernard B, Humphries M, Yeo K, White S, Newton S, Bauer H, Parent J. 1985. Function of glycoprotein glycans. TIBS 110: 78-82.

Ollero M, Bescós O, Cebrián-Pérez JA, Muiño-Blanco T. 1998. Loss of plasma membrane proteins of bull spermatozoa through the freezingthawing process. Theriogenology 49(3): 547-555.

Ollero M, Pérez-Pé R, Muiño-Blanco T, Cebrián-Pérez JA. 1998. Improvement of ram sperm cryopreservation protocols assessed by sperm quality parameters and heterogeneity analysis. Cryobiology 37(1): 1-12.

Ollero M, Cebrián-Pérez JA, Muiño-Blanco T. 1997 Improvement of cryopreserved ram sperm heterogeneity and viability by addition of seminal plasma. Journal of Andrology 18(6): 732-739.

Ollero M, García-López N, Pérez-Pé R, Cebrián-Pérez JA, Muiño-Blanco T. 1997. Surface changes of ram spermatozoa by adsorption of homologous and heterologous seminal plasma proteins revealed by partition in an aqueous two-phase system. Reproduction Fertility and Development 9(4): 381-390.

Ollero M, Muiño-Blanco T, López-Pérez MJ, Cebrián-Pérez JA. 1996. Viability of ram spermatozoa in relation to the abstinence period and successive ejaculations. International Journal of Andrology 19(5): 287-292.

Pixton KL, Deeks ED, Flesch FM, Moseley FL, Bjorndahl L, Ashton PR, Barratt CL, Brewis IA. 2004. Sperm proteome mapping of a patient who experienced failed fertilization at IVF reveals altered expression of at least 20 proteins compared with fertile donors: case report. Human Reproduction 19(6): 1438-1447.

Ricker JV, Linfor JJ, Delfino WJ, Kysar P, Scholtz EL, Tablin F, Crowe JH, Ball BA, Meyers SA. 2006. Equine sperm membrane phase behavior: the effects of lipid-based cryoprotectants. Biology Reproduction 74(2): 359-365.